Основна маса АТФ утворюється на мембранах мітохондрій в ході окисного фосфорилювання H-залежною АТФ-синтазою. Субстратне фосфорилювання АДФ не потребує участі мембранних ферментів, воно відбувається у цитоплазмі у процесі гліколізу або шляхом перенесення фосфатної групи з інших макроергічних сполук.
2 етап. Гліколіз (безкисневий): відбувається у цитоплазмі, ферменти в ньому не беруть участь. Глюкоза розщеплюється до молочної кислоти, при цьому 40% енергії, що виділилася, йде на синтез АТФ.
Енергія АТФ виділяється при гідроліз молекули ферментами аденозинтрифосфатазами; вона витрачається на вчинення м'язового скорочення, зміну форми і руху клітин або їх органел, на перенесення речовин та іонів проти градієнта концентрації (активний транспорт), для виробництва електрич.
АТФ утворюється у мітохондріях (це маленькі структурні компоненти будь-якої клітини, мітохондрія має власну ДНК!, як і ядро клітини!!, це високоорганізована структура).